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                                            一氧化氮測定試劑盒 (A013-2)

                                            使用說明書

                                            僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!

                                            第1版(2016年04月修訂)

                                            [預期應用]

                                            本試劑盒可測血清、血漿、組織樣本和其它生物液體中N0含量

                                            一氧化氮NO (即血管內皮舒張因子),在生物體內作為種反應性極強的自由基,兼有第二信使和神經遞質作用,同時又是一種效應分子,在體內縣有廣泛的生理作用,如松弛血管平滑肌、抑制血小板聚集、調節腦血流、介導細胞毒效應和免疫調節、參與學習和記憶、動脈粥樣硬化等作用。NO產生異常與某些疾病的發生發展有著密切關系。因此,近年來對NO的研究越來越受到廣大科學工作者的重視。

                                             

                                            [試劑盒內容]


                                            試劑

                                            數量(96T)

                                            試劑數量(96T)

                                            Reagent 1

                                            1×20ml

                                            Reagent 5

                                            1×3ml

                                            Reagent 2

                                            1×10ml

                                            2mmol/L Sodium nitrite 標準品

                                            1×1ml

                                            Reagent 3

                                            1×10ml

                                            說明書

                                            1

                                            Reagent 4

                                            1×3ml



                                            測定前雙蒸餾水2mmol/L標準溶液稀釋至20μmol/L。 


                                            [試劑盒的儲存及有效期]

                                            1. Reagent 14oC可保存6個月。              

                                            1. Reagent 24oC可保存6個月。              

                                            2. Reagent 34oC避光可保存6個月。             

                                            3. Reagent 44oC避光可保存6個月。            

                                            4. Reagent 54oC保存6個月。              

                                            5. 2mmol/LSodium nitrite標準4oC保存6個月


                                            [試劑準備]

                                            1. 顯影劑:R3:R4:R5= 2.5:1:1,臨用前制備,在4oC存儲,當顏色加深時不能使用。

                                            2. 標準:用蒸餾水稀釋2 mmol/L亞硝酸鈉標準,分別為1:39、1:79、1:99、1:159、1:319、1:639,制備0.05mmol/L、0.025mmol/L、0.02mmol/L、0.0125mmol/L、0.00 625mmol/L、0.00 3125mmol/L標準溶液。

                                             

                                            [標本處理]

                                            1. 血清

                                            取血清直接用于實驗。

                                            2. 組織樣本

                                            動物組織:取適量組織樣本,稱重,按比例加入生理鹽水制備組織勻漿(質量體積比=1:9,例如900μl生理鹽水中加入100μg組織),2500~3000 0rp/min離心10分鐘,取上清液用于實驗

                                            植物組織:取適量組織樣本,稱重,按比例加入 0.1mol/L PBS(pH7~7.4)制備組織勻漿(質量體積比=1:9,例如900μl0.1mol/L PBS( pH7~7.4)中加入100μg組織),4000rpm/min離心10分鐘,取上清液用于實驗。

                                            細胞樣本:用六孔板培養細胞,若要測定細胞培養上清中的總蛋白含量,則應直接檢測;若要確定細胞的總蛋白含量,則用胰蛋白酶消化細胞(或直接刮取細胞),收集細胞和液體于試管內,1000~3000 rpm/min離心5分鐘,棄上清液。在沉淀中加入1ml生理鹽水,混勻(洗脫胰蛋白酶原和培養液),1000~3000 rpm/min 離心5分鐘,棄上清液并保存沉淀細胞,加入0.2~0.3mL生理鹽水制備勻漿液(有以下4種勻漿方法):a. 細胞裂解液;b. 超聲處理;c. 搖晃; d玻璃勻漿器,每次研磨5~10秒,研磨3~4次,每次間隔20秒,取勻漿用于實驗。

                                            注:取樣前搖勻。

                                             

                                            [操作步驟]

                                            1. 標準品預處理

                                            用蒸餾水稀釋2 mmol/L Sodium nitrite 標準,稀釋倍數分別為1:39、1:79、1:99、1:159、1:319、1:639,制備0.05mmol/L、0.025mmol/L、0.02mmol/L、0.0125mmol/L、0.00625mmol/L、0.003125mmol/L標準溶液。

                                             

                                            2. 樣本預處理

                                            血清(血漿):

                                            100μl 血清(血漿) 加200μl Reagent 1 , 混勻,加100μl Reagent 2,漩渦充分混勻后靜置10分鐘,3500~4000rpm/min離心15分鐘,取上清液160μl 用于實驗

                                            組織勻漿:取300μl 10%勻漿上清液,加200μl Reagent 1 , 混勻,加100μl Reagent 2, 漩渦充分混勻后靜置10分鐘,3500~4000rpm/min離心15分鐘,取上清液160μl 用于實驗

                                             

                                            3. 操作表


                                            空白管標準管樣本管
                                            雙蒸水 (ml)0.16

                                            2 mmol/L Sodium nitrite 標準品(ml)
                                            0.16
                                            上清液(ml)

                                            0.16
                                            顯影劑(ml)0.080.080.08
                                            混勻,靜置15min,在550nm波長測量各孔O.D.值。


                                            [實驗原理]

                                            NO本身半衰期極短,血液中的NO主要由血管內皮細胞、血管平滑肌細胞、血小板、巨噬細胞等產生以亞硝酸鹽及硝酸鹽的形式存在,通過其濃度可以間接測定NO濃度。

                                             

                                            [說明]

                                            1. 嚴格按照說明書進行操作

                                            2. 清液需澄清,若混濁,建議再次離心。

                                            3. 血清樣本出現溶血和渾濁會影響結果。

                                            4. 血液和組織在4~5℃保存3天,溫度越低,保存時間越長。在-20℃下可保存1~2個月。

                                            5. 請參考血清(血漿)檢測培養液并計算。

                                            6. 細胞培養上清樣本測算請參考血清血漿樣本。

                                             

                                            [下載]

                                            MSDA

                                            • Nitric Oxide Assay Kit (A013-2)
                                            圖片展示
                                            • Certificate
                                            通過ISO 9001、ISO 13485質量體系認證
                                            留言咨詢
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                                                                                    <div id="kda0g"></div>
                                                                                            1. <em id="kda0g"><tr id="kda0g"></tr></em>

                                                                                              1. <div id="kda0g"></div>

                                                                                                      <em id="kda0g"><ol id="kda0g"><nav id="kda0g"></nav></ol></em>

                                                                                                    1. <em id="kda0g"></em>

                                                                                                        <em id="kda0g"></em>

                                                                                                      1. <div id="kda0g"><label id="kda0g"><mark id="kda0g"></mark></label></div>

                                                                                                          <div id="kda0g"></div>
                                                                                                          1. <dd id="kda0g"><tr id="kda0g"></tr></dd>
                                                                                                            <em id="kda0g"><label id="kda0g"></label></em>

                                                                                                                <em id="kda0g"></em>

                                                                                                              1. <em id="kda0g"></em>

                                                                                                                      <div id="kda0g"></div>

                                                                                                                          1. <div id="kda0g"></div>
                                                                                                                          2. <em id="kda0g"><ol id="kda0g"></ol></em>

                                                                                                                            <dd id="kda0g"><tr id="kda0g"></tr></dd>
                                                                                                                          3. <div id="kda0g"><ol id="kda0g"></ol></div>
                                                                                                                            万能七码走势图 57798八码中 赛车pk1o 湖北福彩快三精彩十分 亚投彩票首页登录 大乐透走势图浙江风采 一码中特精准资料 安徽快三走势江苏 天津时时开奖号码记录 天津时时彩走势彩经网 六肖中特斯斯准六肖中特斯 欢乐生肖是什么彩 pc蛋蛋计划精准计划 秒速赛计划软件万能码 9796香港开奖结果记录 福彩快三开奖结果